Иммунокорригирующие эффекты полипренилфосфата натрия при развитии иммунного ответа, вызванного белками CagА Нelicobacter pylori в эксперименте

Бактерии Helicobacter pylori (НР) обладают широким спектром факторов патогенности. В геноме НР присутствуют гены группы СagA (cytotoxin-associated genes) - гены, ассоциированные с цитотоксином. Инфицирование CagA⁺ штаммами НР сопровождается продукцией провоспалительных цитокинов, имеющих ключевое значение в поддержании и развитии деструктивно-воспалительных изменений в организме. Целью настоящего исследования явилось изучение роли белков CagA в регуляции иммунного ответа и оценка иммунокорригирующего эффекта полипренилфосфата (ППФ) у мышей. Материалы и методы. Эксперименты выполнены на мышах самцах DBA весом 18-20 г. Использованы генно-модифицированные родственные штаммы живых бактерий E coli, отличающиеся наличием островка генов, кодирующего синтез белков CagA НР. В качестве источника ППФ использован препарат Фоспренил. Оценку субпопуляционного состава клеток селезенки проводили методом проточной цитофлуориметрии с использованием моноклональных антител. Количественное определение IL 10, TGF-β выполняли иммуноферментным методом. Пролиферативную активность спленоцитов определяли стандартным методом по включению³Н-тимидина в ДНК клеток. Результаты исследований свидетельствуют, что белки CagA НР вызывают поляризацию иммунного ответа по Th1-доминантному типу, что выражается в увеличении популяции CD4⁺клеток, Т-клеток экспрессирующих СD25⁺, и CD25⁺ Foxp3⁺ и усилении пролиферативного потенциала иммунокомпетентных Т-лимфоцитов. Введение CagA⁺ бактерий сопровождается увеличением уровня TGF-β, продуцируемого активированными Тreg клетками. Введение ППФ приводило к нормализации содержания CD4 и CD8 Т-клеток, снижению популяций CD25⁺, Foxp3⁺, CD25⁺ Foxp3^+, увеличению IL- 10 в сыворотке. Таким образом, ППФ оказывает корригирующее воздействие на клеточные иммунные реакции, препятствует выраженной поляризации Th1 иммунного ответа, снижает популяционную активацию Тreg клеток. Полученные результаты свидетельствуют о возможном снижении провоспалительного иммунного ответа под воздействием ППФ.

Helicobacter pylori, белки CagА, полипренилфосфат натрия, иммунный ответ, регуляторные Т-клетки, цитокины, мыши

1. Shiota S., Suzuki R., Yamaoka Y. The significance of virulence factors in Helicobater pylori. J. of digestive diseases. 2013; 14(3):341-349. doi: 10.1111/1751-2980.12054.

2. Novikov V. V., Lapin V. A., Melent’ev D.A., Mokhonova E. V. Features of the human immune response to Helicobacter pylori infection. MediAl. 2019;2(24):55-69. doi: 10.21145/2225-0026-2019-2-55-69.@@ Новиков В., В., Лапин В. А., Мелентьев Д. А., Мохонова Е. В. Особенности иммунного ответа человека на инфицирование Helicobacter pylori.МедиАль. 2019;2(24):55-69. doi: 10.21145/2225-0026-2019-2-55-69.

3. Higashi H., Tsutsumi R., Fugita A., Yamazaki S., Asaka M., Azuma T., Hatakeyama M. Biological activity of Helicodfcter pylori virulence factor CagA is determined by variation in the tyrosine phosphorylation sites. PNAS. 2002; 99(22): 14428-14433. doi: 10.1073/pnas.222375399

4. Dadashzadeh K., Milani M., Sorni M. H. The prevalence of Helicobacter pylori cag A, and iceA genotype and possible clinical outcomes. Acta Medica Mediterranea. 2015; 31(7):1345-1349.

5. Zambon C.-F. Helicobacter pylori babA2, cagA, and s1 vacA genes work synergistically in causing intestinal metaplasia. J. Clin. Pathol.2003;56:287-291. doi: 10.1136/jcp.56.4.28.

6. Peek R.M., Fiske C., Wilson K. T. Role of innate immunity in Helicobacter pylori-induced gastric malignancy. Physiol.rev.2010;90:831-858. doi: 10.1152/physrev.00039.2009.

7. Wroblewski L.E., Peek P. M., Wilson K. T. Helicobacter pylori and gastric cancerfactors that modulate diseaserisk. Clin.Microbiol.Rev. 2010;23(4): 713-739. doi: 10.1128/CMR.00011-10.

8. Shibata A., Parsonnet J., Longacre T. A., Garcia M. I., Puligandla B., Davis R. E., Vogelman J. H., Orentreich N., Habel L. A. CagA status of Helicobacter pylori infection and p53 gene mutation in gastric adenocarcinoma. Carcinogenesis. 2002;23:419-424. doi: 10.1093/carcin/23.3.419.

9. Lundgren A., Suri-Payer E., Enarsson K., Svennerholm A-M., Lundin B. S. Helicobacter pylori-specific CD4+high regulatory cells suppress memory T-cell responses to H. pylori in infected individuals. Infect. Immun. 2003;71(4):1765-1762. doi:10.1128/IAI.71.4.1755-1762.2003.

10. Muller A., Oertli M. C., Arnold I. H. pylori exploits and manipulates innate and adaptive immune cell signaling pathways to establish persistent infection. Cell Communication and Signaling. 2011;9(25):2-9.

11. Ferreira R. M., Pinto-Ribeiro I., Wen X., Marcos-Pinto R., Dinis-Ribeiro M., Carneiro F., Figueiredo C. Helicobacter pylori cagAPromoter Region Sequences Influence CagA Expression and Interleukin 8 Secretion. J. Infect. Dis. 2015;213:669-673. doi: 10.1093/infdis/jiv467.

12. Lang B.J., Gorrell R. J., Tafreshi M., Hatakeyama M., Kwok T., Price J. T. The Helicobacter pylori cytotoxin CagA is essential for suppressing host heat shock protein expression. Cell Stress Chaperones. 2016;21:523-533. doi: 10.1007/s12192-016-0680-x.

13. Chernutskaya S. P., Gervazieva V. B. The role of the immune system in the persistence of Helicobacter pylori. Infectious diseases. 2008;6 (2):69-77. (in Russ.)@@ Чернуцкая С. П., Гервазиева В. Б. Роль иммунной системы в персистенции Helicobacter pylori.Инфекционные болезни. 2008;6 (2):69-77.

14. Uspensky Yu.P., Gorbacheva I. A., Suvorov A. N., Galagudzya M. M., Baryshnikova N. V., Bogdanova S. A. Immunological changes in Helicobacter pylori invasion. Vaccine development prospects. Translational medicine. 2018;5(6)31-40. (in Russ.) doi: 10.18705/2311-4495-2018-5-6-31-40.@@ Успенский Ю. П., Горбачева И. А., Суворов А. Н., Галагудзя М. М., Барышникова Н. В., Богданова С. А. Иммунологические изменения при инвазии Helicobacter pylori перспективы создания вакцин. Трансляционная медицина. 2018;5(6)31-40. doi: 10.18705/2311-4495-2018-5-6-31-40.

15. Dubtsova E. A. Some immunological aspects of ulceration. Experimental and Clinical Gastroenterology. 2002; 4:9-14. (in Russ.)@@ Дубцова Е. А. Некоторые иммунологические аспекты язвообразования. Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2002; 4:9-14.

16. Bagneri N., Salimzadeh L., Shizad H. The role of T helper 1-cell response in Helicobacter pylori infection. Microbial pathogenesis. 2018;123:1-8. doi: 10.1016/j.micpath.2018.06.033.

17. Lerner A., Arleevskaya M., et al. Microbes and virus are bugging the gat in celiac disease. Are they friends or foes? Front Microbiol. 2017; 8:1382. doi: 10.3389/fmicb.2017.01392.

18. Jang T. J. The number of Foxp3-positive regulatory T cells is increased in Helicobacter pylori gastritis and gastric cancer. Pathol. Res. pract. 2010; 206:34-38. doi: 10.1016/j.prp.2009.07.019.

19. Lundgren A., Stromberg E., Sjoling A. Mucosal FOXP3-expressing CD4+ CD25+ highregulatory T cells in Helicobacter pylori-infected patients. Infect and Immun. 2005;73:523-531 doi: 10.1128/IAI.73.9.5612-5619.2005.

20. Izcue A., Coombes J. L., Powrie F. Regulatory T cells suppress systemic and mucosal immune activation to controle intestinal inflammation. Immunol.Rev. 2006; 212:256-271. doi: 10.1111/j.0105-2896.2006.00423.x.

21. Сardoso C. R., Teixeria G., Provinciatto P. R. Modulation of mucosal immunity in a murine model of food-induced intestinal inflammation. Clinic Exp.Allergy. 2008;38(2):338-349. doi: 10.1111/j.1365-2222.2007.02866.x.

22. Anderl F, Gerhard M., Helicobacter pylori vaccination: is there a path to protection? J. Gastroenterol. 2014; 20(34): 11939-11949. doi: 10.3748/wjg.v20.i34.11939.

23. Sutton P., Boag J. M. Status of vaccine research and development for Helicobacter pylori. Vaccine. 2019 Nov 28;37(50):7295-7299. doi: 10.1016/j.vaccine.2018.01.001.

24. Chojnacki T., Dallner G. The biological role of dolichol. Biochem J. 1988; 251(1): 1-9. doi: 10.1042/bj2510001.

25. Pronin A. V., Grigorieva E. A., Sanin A. V., Narovlyansky A. N., et al. Polyprenols as possible factors that determine an instructive role of the innate immunity in the acquired immune response.Russian J. Immunol. 2002; 7 (2): 136-141. (in Russ.)

26. Sanin A. V., Ganshina I. V., Sudyina G. F., et al. Phosphorylated polyprenols - a new class of compounds with anti-inflammatory and bronchodilator activity. Infection and immunity. 2011;1(4): 355-360. (in Russ.)@@ Санин А. В., Ганшина И. В., Судьина Г. Ф., Санина В. Ю., Кожевникова Т. Н., Пронин А. В., Наровлянский А. Н., Суханова С. А., Проскурина О. В., Митрохин Н. М. Фосфорилированные полипренолы - новый класс соединений с противовоспалительной и бронхолитической активностью. Инфекция и иммунитет. 2011;1(4): 355-360.

27. Syrov V. N., Weiss E. V., Egamova F. R., et al. Antiulcer activity of polyprenols isolated from cotton leaves. Chemical and Pharmaceutical Journal. 2012;46(3):34-38. (in Russ.)@@ Сыров В. Н., Вайс Е. В., Эгамова Ф. Р., и др. Противоязвенная активность полипренолов, выделенных из листьев хлопчатника. Химико-фармацевтический Журнал. 2012;46(3):34-38.

28. Sobolev S. M., Nikolaeva T. N., Grigorieva E. A., Pronin A. V. Sodium polyprenyl phosphate (phosprenyl) in the mechanism of interleukin-2-dependent recovery of delayed-type hypersensitivity inhibited in vitro. Medical Immunology. 2012;14(4-5):399-402. (in Russ.)@@ Соболев С. М., Николаева Т. Н., Григорьева Е. А., Пронин А. В. Полипренилфосфат натрия (фоспренил) в механизме зависимого от интерлейкина-2 восстановления ингибированной in vitro гиперчувствительности замедленного типа. Медицинск. Иммунол.2012;14(4-5):399-402.

29. Sobolev S. M., Nikolaeva T. N., Grigorieva E. A. Pronin A. V. The role of lectin-substrate recognition in the immunoregulatory interaction of interleukin-2 and Ig G. Medical Immunology. 2010;12(1-2):13-20. (in Russ.)@@ Соболев С. М., Николаева Т. Н., Григорьева Е. А. Пронин А. В. Роль лектин-субстратного распознавания в иммунорегуляторном взаимодействии интерлейкина-2 и Ig G.Медицинская иммунология. 2010;12(1-2):13-20.

30. Sobolev S. M., Nikolaeva T. N., Grigorieva E. A., Pronin A. V. Lactobacillus plantarum and the immunomodulator fosprenil competitively distinguish oligomannosis from N-glycan ovalbumin. J. microbiol. 2011; 6:42-46. (in Russ.)@@ Соболев С. М., Николаева Т. Н.Григорьева Е. А. Пронин А. В.-Lactobacillus plantarum и иммуномодулятор фоспренил конкурентно различают олигоманнозу из N-гликан овальбумина. Ж. микробиол., 2011; 6:42-46.

31. Kandulski A., Malefertheiner P., Wex T. Role of regulatory T-cells in H. pylori-induced gastritis ahd gastric cancer. Anticancer research. 2010 Apr;30(4):1093-103. PMID: 20530414.

32. Beswick E. J., Pinchuk V., Earley R. B., Schmitt D., A., Reyes V. E. Role of gastric e. Piteal cell-derived transforming growth factor β in reduced CD4+ T cell proliferation and development of regulatory T cells during Helicobacter pylori infection. Infect.Iimmun. 2011; 79(7):2737-2745. doi: 10.1128/IAI.01146-10.

33. Stromberg E., Edebo A., Lundin B. S., Bergin P., Brisslert M., Svennerholm A. M., Lindholm C Down-regulation of epithelial IL-8 responses in Helicobacter pylori-infected duodenal ulcer patients depends on host factors, rather than bacterial factors. Clin.exp.Immunol. 2005;140:117-125. doi: 10.1111/j.1365-2249.2005.02736.x.

34. Robinson K., Kenefect R., Pidgeon E. L., et al. Helicobacter pylori induced peptice ulcere disease inassociated with inadequate regulatory T- cell responses. Gut. 2008;37: 1375-1385. doi: 10.1136/gut.2007.137539.

35. Bagheri N., Shirzad H., Elahi S., et al. Downregulated regulatory T cell function is associated with increased peptic ulcer in Helicobacter pylori-infection. Microb Pathog. 2017 Sep;110:165-175. doi: 10.1016/j.micpath.2017.06.040.