Фармакоинформационное исследование синергизма воздействия на микробиоту кишечника пробиотиков Lactobacillus rhamnosus ATCC 53103 (LGG), Bifidobacterium longum CECT 7894 и цитрата цинка

Бактерии с пробиотическими свойствами используются для оздоровления микробиома, состояние которого оказывает разностороннее воздействие на здоровье человека. Эффекты бактерий-пробиотиков штамм-специфичны и могу быть усилены как посредством веществ-пребиотиков (фруктоолигосахариды, инулин и др.), так и посредством эссенциальных микронутриентов. В частности, микроэлемент цинк важен для поддержки нормофизиологической микробиоты кишечника (которая является источником микробиоты всех остальных органов) и для функционирования иммунной системы. В настоящей работе представлены результаты анализа двух перспективных пробиотических штаммов (лактобактерии L. rhamnosus GG (ATCC 53103), бифидобактерии B. longum CECT 7894) и цитрата цинка, являющегося высокоусвояемым источником микроэлемента цинка. Анализ фармакологии L. rhamnosus GG, B. longum CECT 7894, геномов и протеомов изученных пробиотиков и фармакологических свойств цитрата цинка позволил выявить системно-биологический синергизм между изученными штаммами пробиотиков и цинком. Установлено, что аннотированный сегмент протеома L. rhamnosus GG содержит 103 цинк-зависимых белка, а протеома B. longum CECT 7894-204 белка. Выделены функциональные группы белков, реализующих метаболические процессы (1) преимущественно в L. rhamnosus (обмен сахаров, аминокислот метионина и гистидина, протеолиз, витамин-РР-зависимые функции), (2) преимущественно в B. longum (окислительно-восстановительные процессы, нуклеотидный обмен, обмен фруктозы, биосинтетические процессы, детоксикационные процессы, в т. ч. защита от тяжёлых металлов) и (3) в одинаковой степени в L. rhamnosus и B. longum (ремонт ДНК, обработка информации, кодированной в бактериальной ДНК, метаболизм аминокислот серина и глицина, энергетический метаболизм, обмен фолатов, синтез короткоцепочечных жирных кислот - бутирата, пропионата, ацетата и др.). Из результатов протеомного анализа следует, что цитрат цинка, поддерживая метаболизм L. rhamnosus GG и B. longum CECT 7894, усиливает пробиотические свойства обеих бактерий. Этот вывод подтверждается результатами фундаментальных и клинических исследований.

микробиом, пробиотики, L. rhamnosus GG (ATCC 53103), B. longum CECT 7894, цитрат цинка, фармакоинформатика, иммунитет, Аципол® Форте

1. Ардатская М.Д., Логинов В.А., Минушкин О.Н. Новые возможности диагностики и коррекции микроэкологических нарушений кишечника. Consilium Medicum. Гастроэнтерология (Прил.). 2013; 2: 51-58. [Ardatskaya M.D., Loginov V.A., Minushkin O.N. New possibilities of diagnostics and correction of microecological disorders of the intestine. Consilium Medicum. Gastroenterology (Suppl.). 2013; 2: 51-58.]

2. Weiss GA, Hennet T. Mechanisms and consequences of intestinal dysbiosis. Cell Mol Life Sci. 2017 Aug;74(16):2959-2977. https://doi.org/10.1007/s00018-017-2509-x

3. Feng Q, Chen WD, Wang YD. Gut Microbiota: An Integral Moderator in Health and Disease. Front Microbiol. 2018 Feb 21;9:151. https://doi.org/10.3389/fmicb.2018.00151

4. Sanders ME, Merenstein DJ, Reid G, Gibson GR, Rastall RA. Probiotics and prebiotics in intestinal health and disease: from biology to the clinic. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2019 Oct;16(10):605-616. doi: 10.1038/s41575-019-0173-3. Epub 2019 Jul 11. Erratum in: Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2019 Oct;16(10):642. https://doi.org/10.1038/s41575-019-0199-6

5. Szajewska H, Kołodziej M. Systematic review with meta-analysis: Saccharomyces boulardii in the prevention of antibiotic-associated diarrhoea. Aliment Pharmacol Ther. 2015 Oct;42(7):793-801. https://doi.org/10.1111/apt.13344

6. Громова О.А., Торшин И.Ю., Чучалин А.Г., Максимов В.А. Микробиом, пробиотики и COVID-19: перспективные подходы к поддержке систем врожденного и приобретённого иммунитета. Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2021;188(4): 66-73. https://doi.org/10.31146/1682-8658-ecg-188-4-66-73

7. Torshin, I.Y. On solvability, regularity, and locality of the problem of genome annotation. Pattern Recognit. Image Anal. 20, 386-395 (2010). https://doi.org/10.1134/S1054661810030156

8. Рудаков К.В., Торшин И.Ю. Вопросы разрешимости задачи распознавания вторичной структуры белка. Информатика и ее применения. 2010. Т. 4. № 2. С. 25-35. [Rudakov K.V., Torshin I. Yu. Questions of solvability of the problem of protein secondary structure recognition. Informatics and its applications. 2010. Vol. 4. No. 2. P. 25-35.]

9. Громова О.А., Торшин И.Ю., Кобалава Ж.Д., Сорокина М.А., Виллевальде С.В., Галочкин С.А., Гоголева И.В., Грачева О.Н., Гришина Т.Р., Громов А.Н., Егорова Е.Ю., Калачева А.Г., Малявская С.И., Мерай И.А., Семенов В.А. Дефицит магния и гиперкоагуляционные состояния: метрический анализ данных выборки пациентов 18-50 лет лечебно-профилактических учреждений России. Кардиология. 2018;58(4):22-35. https://doi.org/10.18087/cardio.2018.4.10106 [Gromova O.A., Torshin I. Yu., Kobalava Zh.D., Sorokina M.A., Villevalde S.V., Galochkin S.A., Gogoleva I.V., Gracheva O.N., Grishina T.R., Gromov A.N., Egorova E. Yu., Kalacheva A.G., Malyavskaya S.I., Merai I.A., Semenov V.A. Deficit of Magnesium and States of Hypercoagulation: Intellectual Analysis of Data Obtained From a Sample of Patients Aged 18-50 years From Medical and Preventive Facilities in Russia. Kardiologiia. 2018;58(4):22-35. (In Russ.) https://doi.org/10.18087/cardio.2018.4.10106

10. Торшин И.Ю., Громова О.А., Стаховская Л.В., Ванчакова Н.П., Галустян А.Н., Кобалава Ж.Д., Гришина Т.Р., Громов А.Н., Иловайская И.А., Коденцова В.М., Калачева А.Г., Лиманова О.А., Максимов В.А., Малявская С.И., Мозговая Е.В., Тапильская Н.И., Рудаков К.В., Семенов В.А. Анализ 19,9 млн публикаций базы данных PubMed/MEDLINE методами искусственного интеллекта: подходы к обобщению накопленных данных и феномен “fake news”. ФАРМАКОЭКОНОМИКА. Современная фармакоэкономика и фармакоэпидемиология. 2020;13(2):146-163. https://doi.org/10.17749/2070-4909/farmakoekonomika.2020.021 [Torshin I. Yu., Gromova O.A., Stakhovskaya L.V., Vanchakova N.P., Galustyan A.N., Kobalava Zh.D., Grishina T.R., Gromov A.N., Ilovaiskaya I.A., Kodentsova V.M., Kalacheva A.G., Limanova O.A., Maksimov V.A., Malyavskaya S.I., Mozgovaya E.V., Tapilskaya N.I., Rudakov K.V., Semenov V.A. Analysis of 19.9 million publications from the PubMed/MEDLINE database using artificial intelligence methods: approaches to the generalizations of accumulated data and the phenomenon of “fake news. FARMAKOEKONOMIKA. Modern Pharmacoeconomics and Pharmacoepidemiology. 2020;13(2):146-163. (In Russ.)]

11. Cheong YE, Kim J, Jin YS, Kim KH. Elucidation of the fucose metabolism of probiotic Lactobacillus rhamnosus GG by metabolomic and flux balance analyses.J Biotechnol. 2022 Dec 10;360:110-116. https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2022.11.002

12. Lin R, Sun Y, Mu P, Zheng T, Mu H, Deng F, Deng Y, Wen J. Lactobacillus rhamnosus GG supplementation modulates the gut microbiota to promote butyrate production, protecting against deoxynivalenol exposure in nude mice. Biochem Pharmacol. 2020 May;175:113868. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2020.113868

13. Capurso L. Thirty Years of Lactobacillus rhamnosus GG: A Review. J Clin Gastroenterol. 2019 Mar;53 Suppl 1: S1-S41. https://doi.org/10.1097/MCG.0000000000001170

14. Bhatnagar K, Jha K, Dalal N, Patki N, Gupta G, Kumar A, Kumar A, Chaudhary S. Exploring micronutrients and microbiome synergy: pioneering new paths in cancer therapy.Front Immunol. 2024 Nov 29;15:1442788. https://doi.org/10.3389/fimmu.2024.1442788

15. Lee SU, Jang BS, Na YR, Lee SH, Han S, Chang JH, Kim HJ. Effect of Lactobacillus Rhamnosus GG for Regulation of Inflammatory Response in Radiation-Induced Enteritis.Probiotics Antimicrob Proteins. 2024 Apr;16(2):636-648. https://doi.org/10.1007/s12602-023-10071-9

16. Solano-Aguilar G, Molokin A, Botelho C, Fiorino AM, Vinyard B, Li R, Chen C, Urban J Jr, Dawson H, Andreyeva I, Haverkamp M, Hibberd PL. Transcriptomic Profile of Whole Blood Cells from Elderly Subjects Fed Probiotic Bacteria Lactobacillus rhamnosus GG ATCC 53103 (LGG) in a Phase I Open Label Study.PLoS One. 2016 Feb 9;11(2): e0147426. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0147426

17. Kim SW, Park KY, Kim B, Kim E, Hyun CK. Lactobacillus rhamnosus GG improves insulin sensitivity and reduces adiposity in high-fat diet-fed mice through enhancement of adiponectin production.Biochem Biophys Res Commun. 2013 Feb 8;431(2):258-63. https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2012.12.121

18. Gao T, Li R, Hu L, Hu Q, Wen H, Zhou R, Yuan P, Zhang X, Huang L, Zhuo Y, Xu S, Lin Y, Feng B, Che L, Wu D, Fang Z. Probiotic Lactobacillus rhamnosus GG improves insulin sensitivity and offspring survival via modulation of gut microbiota and serum metabolite in a sow model.J Anim Sci Biotechnol. 2024 Jul 2;15(1):89. https://doi.org/10.1186/s40104-024-01046-z

19. Zhao Y, Liu S, Tang Y, You T, Xu H. Lactobacillus rhamnosus GG Ameliorated Long-Term Exposure to TiO(2) Nanoparticles Induced Microbiota-Mediated Liver and Colon Inflammation and Fructose-Caused Metabolic Abnormality in Metabolism Syndrome Mice.J Agric Food Chem. 2021 Sep 1;69(34):9788-9799. https://doi.org/10.1021/acs.jafc.1c03301

20. Shi CW, Cheng MY, Yang X, Lu YY, Yin HD, Zeng Y, Wang RY, Jiang YL, Yang WT, Wang JZ, Zhao DD, Huang HB, Ye LP, Cao X, Yang GL, Wang CF. Probiotic Lactobacillus rhamnosus GG Promotes Mouse Gut Microbiota Diversity and T Cell Differentiation.Front Microbiol. 2020 Dec 17;11:607735. https://doi.org/10.3389/fmicb.2020.607735

21. Hu R, Yang T, Ai Q, Shi Y, Ji Y, Sun Q, Tong B, Chen J, Wang Z. Autoinducer-2 promotes the colonization of Lactobacillus rhamnosus GG to improve the intestinal barrier function in a neonatal mouse model of antibiotic-induced intestinal dysbiosis.J Transl Med. 2024 Feb 18;22(1):177. https://doi.org/10.1186/s12967-024-04991-5

22. Ju Z, Pan H, Qu C, Xiao L, Zhou M, Wang Y, Luo J, Shen L, Zhou P, Huang R. Lactobacillus rhamnosus GG ameliorates radiation-induced lung fibrosis via lncRNASNHG17/PTBP1/NICD axis modulation.Biol Direct. 2023 Jan 12;18(1):2. https://doi.org/10.1186/s13062-023-00357-x

23. Tan W, Zhou Z, Li W, Lu H, Qiu Z. Lactobacillus rhamnosus GG for Cow’s Milk Allergy in Children: A Systematic Review and Meta-Analysis.Front Pediatr. 2021 Oct 22;9:727127. https://doi.org/10.3389/fped.2021.727127

24. Näse L, Hatakka K, Savilahti E, Saxelin M, Pönkä A, Poussa T, Korpela R, Meurman JH. Effect of long-term consumption of a probiotic bacterium, Lactobacillus rhamnosus GG, in milk on dental caries and caries risk in children. Caries Res. 2001 Nov-Dec;35(6):412-20. https://doi.org/10.1159/000047484

25. Hao Q, Dong BR, Wu T. Probiotics for preventing acute upper respiratory tract infections.Cochrane Database Syst Rev. 2015 Feb 3;(2): CD006895. https://doi.org/10.1002/14651858.CD006895.pub3

26. Yin Z, Wang Y, Feng X, Liu C, Guan X, Liu S, Long Z, Miao Z, He F, Cheng R, Han Y, Li K. Lactobacillus rhamnosus GG and Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB-12 promote infected wound healing via regulation of the wound microenvironment.Microb Biotechnol. 2024 Oct;17(10): e70031. https://doi.org/10.1111/1751-7915.70031

27. Wang L, Zhao R, Li X, Shao P, Xie J, Su X, Xu S, Huang Y, Hu S. Lactobacillus rhamnosus GG improves cognitive impairments in mice with sepsis.PeerJ. 2024 May 28;12: e17427. https://doi.org/10.7717/peerj.17427

28. Fu Y, Chen YS, Xia DY, Luo XD, Luo HT, Pan J, Ma WQ, Li JZ, Mo QY, Tu Q, Li MM, Zhao Y, Li Y, Huang YT, Chen ZX, Li ZJ, Bernard L, Dione M, Zhang YM, Miao K, Chen JY, Zhu SS, Ren J, Zhou LJ, Jiang XZ, Chen J, Lin ZP, Chen JP, Ye H, Cao QY, Zhu YW, Yang L, Wang X, Wang WC. Lactobacillus rhamnosus GG ameliorates hyperuricemia in a novel model.NPJ Biofilms Microbiomes. 2024 Mar 20;10(1):25. https://doi.org/10.1038/s41522-024-00486-9

29. Zhu L, Niu J, Tang XC, Shan LH, Xiao L, Wang YQ, Yin LY, Yu YY, Li XR, Zhou P. The Effects of Probiotic Lactobacillus rhamnosus GG on Fecal Flora and Serum Markers of Renal Injury in Mice with Chronic Kidney Disease.Front Biosci (Landmark Ed). 2023 Sep 26;28(9):226. https://doi.org/10.31083/j.fbl2809226

30. Zhai T, Ren W, Wang P, Zheng L. Lactobacillus rhamnosus GG protects against atherosclerosis by improving ketone body synthesis.Appl Microbiol Biotechnol. 2022 Dec;106(24):8233-8243. https://doi.org/10.1007/s00253-022-12265-7

31. Picard C, Fioramonti J, Francois A, Robinson T, Neant F, Matuchansky C. Review article: bifidobacteria as probiotic agents - physiological effects and clinical benefits. Aliment Pharmacol Ther. 2005 Sep 15;22(6):495-512. doi: 10.1111/j.1365-2036.2005.02615.x. PMID: 16167966. 33. Martínez-Martínez MI, Calabuig-Tolsá R, Cauli O. The effect of probiotics as a treatment for constipation in elderly people: A systematic review.Arch Gerontol Geriatr. 2017 Jul;71:142-149. https://doi.org/10.1016/j.archger.2017.04.004

32. Li J, Xu L, Liao J, Li X, Wang X, Wu Q, Zhu L. In vitro intestinal simulation system on the carbon source utilization characteristics and mechanism of interspecific syntrophic effects of Bifidobacterium longum CECT7894 and Pediococcus pentosaceus CECT8330.Front Pediatr. 2023 Dec 14;11:1276846. https://doi.org/10.3389/fped.2023.1276846

33. Xiao F, Dong F, Li X, Li Y, Yu G, Liu Z, Wang Y, Zhang T. Bifidobacterium longum CECT 7894 Improves the Efficacy of Infliximab for DSS-Induced Colitis via Regulating the Gut Microbiota and Bile Acid Metabolism.Front Pharmacol. 2022 Aug 1;13:902337. https://doi.org/10.3389/fphar.2022.902337

34. Chen K, Liu C, Li H, Lei Y, Zeng C, Xu S, Li J, Savino F. Infantile Colic Treated With Bifidobacterium longum CECT7894 and Pediococcus pentosaceus CECT8330: A Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Trial.Front Pediatr. 2021 Sep 10;9:635176. https://doi.org/10.3389/fped.2021.635176

35. Громова О.А., Торшин И.Ю. Об использовании цинка и витамина С для профилактики и адъювантной терапии острых респираторных заболеваний. Терапия. 2017. № 1. С. 36-46. [Gromova O.A., Torshin I. Yu. On the use of zinc and vitamin C for the prevention and adjuvant therapy of acute respiratory diseases. Therapy. 2017. No. 1. P. 36-46.]

36. Громова О.А.,, Шиляев Р.Р., Торшин И.Ю., Калачева А.Г., Галицкая С.А., Лиманова О.А., Волков А.Ю., Гришина Т.Р., Федотова Л.Э., Жевнеров А.В. Использование различных способов приема биоусвояемых органических солей цинка с экстрактом молозива у часто и длительноболеющих детей. Пед. фармакол. 2009; 6 (1): 37-42. [Gromova O.A., Shilyaev R.R., Torshin I. Yu., Kalacheva A.G., Galitskaya S.A., Limanova O.A., Volkov A. Yu., Grishina T.R., Fedotova L.E., Zhevnerov A.V. Use of different methods of administration of bioavailable organic zinc salts with colostrum extract in frequently and long-term ill children. Ped. pharmacol. 2009; 6 (1): 37-42.]

37. Громова О.А., Торшин И.Ю. Цинк как необходимый элемент профилактики врожденных пороков развития плода. Медицинский алфавит. 2016. Т. 1. № 7. С. 19-25. [Gromova O.A., Torshin I. Yu. Zinc as a necessary element for the prevention of congenital malformations of the fetus. Medical alphabet. 2016. Vol. 1. No. 7. P. 19-25.]

38. Громова О.А., Торшин И.Ю. Микронутриенты и репродуктивное здоровье. Руководство. 2-е издание переработанное и дополненное. ГЭОТАР-Медиа, 2022, 832 c., ISBN 978-5-9704-6786-2. [Gromova O.A., Torshin I. Yu. Micronutrients and reproductive health. Manual. 2nd edition revised and supplemented. GEOTAR-Media, 2022, 832 p., ISBN 978-5-9704-6786-2.]

39. Johanns VC, Epping L, Semmler T, Ghazisaeedi F, Lübke-Becker A, Pfeifer Y, Eichhorn I, Merle R, Bethe A, Walther B, Wieler LH. High-Zinc Supplementation of Weaned Piglets Affects Frequencies of Virulence and Bacteriocin Associated Genes Among Intestinal Escherichia coli Populations.Front Vet Sci. 2020 Dec 16;7:614513. https://doi.org/10.3389/fvets.2020.614513

40. Li D, Achkar JP, Haritunians T, Jacobs JP, Hui KY, D’Amato M, Brand S, Radford-Smith G, Halfvarson J, Niess JH, Kugathasan S, Büning C, Schumm LP, Klei L, Ananthakrishnan A, Aumais G, Baidoo L, Dubinsky M, Fiocchi C, Glas J, Milgrom R, Proctor DD, Regueiro M, Simms LA, Stempak JM, Targan SR, Törkvist L, Sharma Y, Devlin B, Borneman J, Hakonarson H, Xavier RJ, Daly M, Brant SR, Rioux JD, Silverberg MS, Cho JH, Braun J, McGovern DP, Duerr RH. A Pleiotropic Missense Variant in SLC39A8 Is Associated With Crohn’s Disease and Human Gut Microbiome Composition.Gastroenterology. 2016 Oct;151(4):724-32. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2016.06.051

41. Ammendola S, Pasquali P, Pistoia C, Petrucci P, Petrarca P, Rotilio G, Battistoni A. High-affinity Zn2+ uptake system ZnuABC is required for bacterial zinc homeostasis in intracellular environments and contributes to the virulence of Salmonella enterica.Infect Immun. 2007 Dec;75(12):5867-76. https://doi.org/10.1128/IAI.00559-07

42. Overbeck S, Rink L, Haase H. Modulating the immune response by oral zinc supplementation: a single approach for multiple diseases.Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 2008 Jan-Feb;56(1):15-30. https://doi.org/10.1007/s00005-008-0003-8

43. Громова О.А. Торшин И.Ю. Важность цинка для поддержания активности белков врожденного противовирусного иммунитета: анализ публикаций, посвященных COVID-19. Профилактическая медицина. 2020;23(3):131-139. https://doi.org/10.17116 [Gromova O.A., Torshin I. Yu. The importance of zinc for maintaining the activity of proteins of innate antiviral immunity: analysis of publications devoted to COVID-19. Preventive Medicine. 2020;23(3):131-139. https://doi.org/10.17116]

44. Pernelle JJ, Creuzet C, Loeb J, Gacon G. Phosphorylation of the lymphoid cell kinase p56lck is stimulated by micromolar concentrations of Zn2+.FEBS Lett. 1991 Apr 9;281(1-2):278-82. https://doi.org/10.1016/0014-5793(91)80411-u

45. Bao S, Knoell DL. Zinc modulates cytokine-induced lung epithelial cell barrier permeability.Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2006 Dec;291(6): L1132-41. https://doi.org/10.1152/ajplung.00207.2006

46. Coto JA, Hadden EM, Sauro M, Zorn N, Hadden JW.Interleukin 1 regulates secretion of zinc-thymulin by human thymic epithelial cells and its action on T-lymphocyte proliferation and nuclear protein kinase C. Proc Natl Acad Sci U S A. 1992 Aug 15;89(16):7752-6. d https://doi.org/10.1073/pnas.89.16.7752

47. Berg K, Bolt G, Andersen H, Owen TC. Zinc potentiates the antiviral action of human IFN-alpha tenfold.J Interferon Cytokine Res. 2001 Jul;21(7):471-4. https://doi.org/10.1089/10799900152434330

48. Langklotz S, Baumann U, Narberhaus F. Structure and function of the bacterial AAA protease Fts H. Biochim Biophys Acta. 2012 Jan;1823(1):40-8. https://doi.org/10.1016/j.bbamcr.2011.08.015

49. Solopova A, Bottacini F, Venturi Degli Esposti E, Amaretti A, Raimondi S, Rossi M, van Sinderen D. Riboflavin Biosynthesis and Overproduction by a Derivative of the Human Gut Commensal Bifidobacterium longum subsp. infantis ATCC 15697. Front Microbiol. 2020 Sep 15;11:573335. https://doi.org/10.3389/fmicb.2020.573335

50. Zhu YY, Thakur K, Feng JY, Zhang JG, Hu F, Cespedes-Acuña CL, Liao C, Wei ZJ. Riboflavin Bioenriched Soymilk Alleviates Oxidative Stress Mediated Liver Injury, Intestinal Inflammation, and Gut Microbiota Modification in B2 Depletion-Repletion Mice. J Agric Food Chem. 2022 Mar 30;70(12):3818-3831. https://doi.org/10.1021/acs.jafc.2c00117

51. Stenmark P, Moche M, Gurmu D, Nordlund P. The crystal structure of the bifunctional deaminase/reductase RibD of the riboflavin biosynthetic pathway in Escherichia coli: implications for the reductive mechanism. J Mol Biol. 2007 Oct 12;373(1):48-64. https://doi.org/10.1016/j.jmb.2006.12.009

52. Monti SM, De Simone G, D’Ambrosio K. L-Histidinol Dehydrogenase as a New Target for Old Diseases. Curr Top Med Chem. 2016;16(21):2369-78. https://doi.org/10.2174/1568026616666160413140000

53. Kvan OV, Gavrish IA, Lebedev SV, Korotkova AM, Miroshnikova EP, Serdaeva VA, Bykov AV, Davydova NO. Effect of probiotics on the basis of Bacillus subtilis and Bifidobacterium longum on the biochemical parameters of the animal organism.Environ Sci Pollut Res Int. 2018 Jan;25(3):2175-2183. https://doi.org/10.1007/s11356-017-0534-9

54. Devi S, Chhibber S, Harjai K. Optimization of cultural conditions for enhancement of anti-quorum sensing potential in the probiotic strain Lactobacillus rhamnosus GG against Pseudomonas aeruginosa.3 Biotech. 2022 Jun;12(6):133 https://doi.org/10.1007/s13205-022-03187-2

55. Kalita A, Talukdar M, Sarma K, Kalita PC, Barman NN, Roychoudhury P, Kalita G, Choudhary OP, Doley PJ, Debroy S, Keneisenuo K, Sarkar R. Lymphocyte subsets in the small intestine of piglets fed with probiotic and zinc: a qualitative and quantitative micro-anatomical study. Folia Morphol (Warsz). 2022;81(1):82-90. https://doi.org/10.5603/FM.a2020.0148

56. Laitinen K, Kalliomäki M, Poussa T, Lagström H, Isolauri E. Evaluation of diet and growth in children with and without atopic eczema: follow-up study from birth to 4 years.Br J Nutr. 2005 Oct;94(4):565-74. https://doi.org/10.1079/bjn20051503

57. Abdulah DM, Sulaiman SJ, Ahmed ZW. Effect of probiotics plus zinc supplementation on clinical outcomes of infants and children with acute infectious diarrhea: a randomized controlled trial.Clin Exp Pediatr. 2024 Apr;67(4):203-212. https://doi.org/10.3345/cep.2023.01340

58. Yalcin G, Demirbas F, Bacalan F, Toy EB. Evaluation of treatment in acute gastroenteritis: A comparative study.J Pak Med Assoc. 2022 Oct;72(10):2019-2024. https://doi.org/10.47391/JPMA.4438

59. Bruzzese E, Fedele MC, Bruzzese D, Viscovo S, Giannattasio A, Mandato C, Siani P, Guarino A. Randomised clinical trial: a Lactobacillus GG and micronutrient-containing mixture is effective in reducing nosocomial infections in children, vs. placebo.Aliment Pharmacol Ther. 2016 Sep;44(6):568-75. https://doi.org/10.1111/apt.13740