Цель исследования - влияние милдроната на пролиферацию гепатоцитов и на активность ферментов печени крыс при физической нагрузке различной интенсивности. Материал и методы исследования. В качестве экспериментальных животных были использованы 84 белые самцы крыс весом 240 грамм. Животные были разделены на три группы. Эксперимент проводили в два этапа. В первом этапе крысам давали нагрузку разной интенсивности: первой группе крыс давали легкую физическую нагрузку, для чего их помещали в ванну с температурой воды 29-32˚С в которой животные плавали 15 минут. Крысы второй группы проводили в ванне 30 минут; эту нагрузку расценивали средней тяжести. Для воспроизведения тяжёлой физической нагрузки (третья группа) животные плавали в ванной до тех пор, пока они не начинали терять силы и тонуть. Обычно это наступало через 55-59 минут после нахождения животных в воде. После извлечения из ванны животные этой группы, в отличие от животных первых двух групп, были вялыми, некоторое время лежали, не принимали пищу. Животными всех групп было выполнено 10 сеансов водной нагрузки после чего их выводили их эксперимента сразу после последнего сеанса (7 животных на группу) и через 30 суток после окончания эксперимента (по 7 животных на группу) с применением золетилового наркоза из расчета 5 мг на 100 г в соответствии с Международными правилами проведения работ с экспериментальными животными. На втором этапе другая группа крыс, также разбитая на три группы, получали аналогичную нагрузку разной интенсивности, однако на протяжении всего эксперимента (10 дней) ежедневно отмечалось пероральное введение милдроната, 3-(2,2,2-триметилгидразин) пропионата в дозе 100 мг/ кг. Контрольными животными (n=7) были белые крыс весом 240 грамм. После извлечения печени из неё вырезали кусочки размером 1Ч1 см, которые фиксировали в 10% нейтральном формалине и заключали в парафин; полученные серийные срезы окрашивали гематоксилином и эозином и по ван Гизон. Двуядерные гепатоциты подчитывали на 7000 клеток. Гистохимически в гепатоцитах определяли СДГ, NADH, NADFH, кислую и щелочную фосфатазы. Статистический анализ проведен в программе «Statistica-6». Для анализа различий между выборками использовали t-критерий Стьюдента. Результаты и их обсуждение. Выполненное исследование установило, что применение милдроната при выполнении крысами физической нагрузки существенным образом меняет ситуацию: увеличивается пролиферативная активность гепатоцитов при выполнении крысами лёгкой и средней тяжести нагрузки, протекающая на фоне повышения активности окислительно-восстановительных ферментов. При выполнении крысами тяжёлой нагрузки использование милдроната поддерживает репродуктивные потенции гепатоцитов и нормальную ферментативную характеристику печени. Заключение. Выполненное исследование показывает, что применение милдроната не только желательно при выполнении животными тяжёлой физической нагрузки, но и, по-видимому, является необходимым по жизненным показаниям.
The purpose of the study is the effect of mildronate on the proliferation of hepatocytes and on the activity of liver enzymes in rats during physical activity of varying intensity. Material and methods. 84 white male rats weighing 240 grams were used as experimental animals. The animals were divided into three groups. The experiment was carried out in two stages. In the first stage, the rats were given loads of varying intensity: the first group of rats was given a light physical load, for which they were placed in a bath with a water temperature of 29-32˚C in which the animals swam for 15 minutes. The rats of the second group spent 30 minutes in the bath; this load was considered to be of moderate severity. To simulate heavy physical activity (third group), the animals swam in the bath until they began to lose strength and drown. This usually occurred 55-59 minutes after the animals were in the water. After being removed from the bath, the animals of this group, unlike the animals of the first two groups, were lethargic, lay down for some time, and did not eat. Animals of all groups underwent 10 sessions of water loading, after which they were taken out of the experiment immediately after the last session (7 animals per group) and 30 days after the end of the experiment (7 animals per group) using zoletil anesthesia at the rate of 5 mg per 100 g in accordance with the International Rules for Work with Experimental Animals. At the second stage, another group of rats, also divided into three groups, received a similar load of varying intensity, however, throughout the entire experiment (10 days), oral administration of mildronate, 3-(2,2,2-trimethylhydrazine) propionate at a dose of 100 mg was observed daily. / kg. Control animals (n=7) were white rats weighing 240 grams. After removing the liver, pieces measuring 1x1 cm were cut out from it, which were fixed in 10% neutral formaldehyde and embedded in paraffin; The resulting serial sections were stained with hematoxylin and eosin and van Gieson. Binucleate hepatocytes were counted per 7000 cells. SDH, NADH, NADFH, acid and alkaline phosphatases were determined histochemically in hepatocytes. Statistical analysis was carried out using the Statistica-6 program. Student’s t-test was used to analyze differences between samples. Research results. The study found that the use of mildronate when rats performed physical activity significantly changes the situation: the proliferative activity of hepatocytes increases when rats perform light and moderate exercise, occurring against the background of increased activity of redox enzymes. When rats perform heavy workloads, the use of mildronate supports the reproductive potency of hepatocytes and the normal enzymatic characteristics of the liver. Conclusion. The study shows that the use of mildronate is not only desirable when animals perform heavy physical activity, but also, apparently, is necessary for health reasons.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.